国内库来源基础
细胞名称 大鼠雪旺细胞；RSC-96
形态特性 神经元样
生长特性 贴壁生长
特征特性 RSC96细胞株是原代培养的大鼠雪旺细胞经长时间培养后自发转化而成的[PubMed:9766530]。2002年十二月提交到ATCC的培养物污染了支原体。其后代通过BM细胞周期蛋白处理21天消除支原体。处理后六周，用Hoechst染色、PCR和标准培养测试进行支原体检测。结果都呈阴性。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:2~1:6传代；2~3天换液1次。
传代情况
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS　

该系注意事项-备份方案参考
目的应用，超量培养、类器官上前状态调整、超长维持培养、分化后超长时间培养
关键词： T25 瓶 、 细胞培养摇匀、 DPBS(不含钙镁) 、成团成片（优化胰酶）、培养环境及细胞需要每日观察、酸碱-细胞中培养基颜色观察要仔细-问题沟通中偏黄，偏紫要描述准确，

1：建议长期做下传统DMSO与无血清冻存比较，细工推荐DMSO,用量8% ，程序降温建议用泡沫盒方法，统计意义，后面自动化应用、对冻存挑剔细胞（耐药株系、原代自建系、工业户种子细胞）、了解胰酶特点辅助冻存的用户的来信注明（发地址联系人，注明案例细胞名称），复苏后碎片过多的用户建议参考细工传统方案。优化胰酶消化虽然费时，可复苏后高活率，大大节省整体实验时间。复苏后细胞活率还说明细胞状态更好。
2：含血清为主，ATCC疑问讨论(支原体污染过细胞）,通过黑点，生长慢优化后救助，慢培养路线，瓶培养后，避免皿-PH变化快,3-X天以上增殖的系，瓶方式能理解的用户，应用前建议提前关注几个重要参考排查，排查培养箱设置、培养基成分，以及培养器皿是否异常。（黑点问题不见得是污染，更多案例统计后，在公布参考）原代含血清方案，熟练实验室及国内库，概率都是4-7天都可顺利长满并传代，也是我司力推含血清理由，无血清部分考虑影响因素更多，需讨论可详细先告知细节。
3：需超量雪旺细胞，分化后维持培养（或类器官应用的），更好状态，可试试细工方案及试剂，
4：消化，雪旺壁厚，对膜要求高，细工胰酶又明显优势，该株转染前、冻存前、膜片钳等实验使用后，避免细胞膜损伤，后面实验会更好（建议做细工方案备份组）。常规胰酶浓度0.25消化需8-9 min以上的，细工胰酶后面培养细胞质量会有优势明显，MDCK、上皮、细胞壁厚细胞，成团成片，iPSC含血清方案，细工优势在，不怕消化过，细胞膜无损，在实验中，可同时处理几十盘细胞，该方案应用前，自己要做预实验，并建议用胰酶敏感细胞验证，拿到预实验数据，后面相关很多实验都会用到，并是较关键步骤，细工在自动化培养冗余试剂开发中，试剂容错能力，对细胞质量后期实验目的超量，维持培养及要求高的实验。

该细胞需特别注意:
RSC96 细胞生长形态为神经元样长梭形形态，细胞生长至过密时细胞会变成圆形细胞，细胞生长至80%即可传代。细胞对血清质量较为敏感。

细工不同建议与后面预实验参考验证：通过胶质类细胞规模培养，工业用户对培养基成本要求高用户，上清部分回输可比全新完全培养基增殖明显快，也相应减少成本费用，后面自动化培养-冗余试剂开发还有更多问题挑战，也建议用户做预实验组，做备份方法。工业用户胶质类用户可深入讨论规模培养，自动化培养、维持培养等应用。