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黑胶虫污染统计

作者:北京弘博康医药科技有限公司 2011-12-02T00:00 (访问量:11617)

黑胶虫污染统计,如有时间可将发生污染的血清牌子、型号、批号等详细信息发我,统计结果大家共享(因跟操作步骤也有关,统计准确结果较难)我司只先做相关统计,有过污染的客户请用酒精消毒所有相关器物,包括细胞培养箱。

用进口血清的实验室注意,如自愿加入我公司细胞统计的可将细胞名录中文英文(最好有图片)列表发我,如直接从ATCC进口的请注明,我司统计后的结果会和大家共享统计结果。

 

20230926经12年相关案例统计,细工参考建议: 过关进口耗材试剂,很少有黑点,即便是保种级别试剂,操作生硬粗暴也会有黑点发生,可参考我们广谱杀菌相关方法与操作。更多数据还需更多案例疑问与解决情况,疫情后国产试剂耗材众多,细工建议用RAW264.7验证参考有些意义。其他重点室特殊细胞培养,特殊手法需求及问题都可讨论,我司优势结合难养类肝、乳腺类、免疫悬浮类,腺类、上皮类等难点多重考虑给出建议参考。海归老师提问问题非常重视,跟接近国外一流梯队技术水平,老师多多提携指正。我们不怕问题,更多问题才会出现更优产品。

 

20240923

 问题关于黑点

细工建议参考,用对试剂耗材(种子库级别细胞不建议用便宜试剂,保种上百只种子细胞,也用不了多少钱的)胰酶轻柔处理(避免枪直接吹打细胞损伤也是较重要指标参数),几代或十几代后,黑点会全部消失。这个建议也只是救助办法参考建议,经历过黑点的细胞,建议重新保种国内正规库来源细胞。

结合系生长慢参考

    细工建议参考 给出方案是进口瓶培养(康宁,nunc,德国产细工全部现货) ,种子库级别试剂(三千以上胎牛,我司验证五年以上南美)我司培养基或者是GIBCO培养基,放足培养基(多些也没关系)几天不动,看下恢复情况,结合我司胰酶(无损消化)传几代应该能找回较好状态,该方法也适合细胞养几代后就爬爬这种情况(上述方法也适合细胞养传代后细胞就爬爬这种情况,该因素原因很多,具体情况集体分析)该方法也建议原代首代培养(类器官)就是普通培养基加胎牛(因子贵,lag phase长、无血清不稳点)全部能替代,细胞够多或稳定后在上无血清可做参考。类器官配套耗材U型低(不加辅助条件成球)及磁珠配套磁力成球可来信告知索取资料及技术讨论。邮件联系

 

上述思路解决要顺利,来信告知,目前统计进口试剂耗材成功案例,有细胞生长慢,黑点案例都误认为是支原体,合作实验室比较熟悉培养体系,应用后,任何问题都没有,就是复苏初期老师比较心急,没按正常传代后,皿居多,三天以上后,pH变化较快,影响了后面生长。如验证,到任何问题难点都可来信讨论。如有理想趋势生长,胰酶建议用0.05或者我司胰酶(上皮类成片解决要柔和,常规0.25浓度容易消化成细胞泥,膜损伤厉害,对细胞损伤很大,影响救助) 

我们会统计更多难点应用有

成瘤不理想细胞株

耐药株复苏救助

细胞养几代后就爬爬这种情况

该理由来自类器官培养统计,及下面各类难养株常年统计,下面内容有需要的可来信告知。我发您,要有针对的痛点难点,我们会补充更多资料。

救助细胞系建议来源国内正规库,公司来源差很多。如照顾我司生意长期订购试剂,我们可送国内库同类细胞株做奖励,我司今年试剂所有原料都是临床原料级别。能到种子库级别。

 

相关救助方案我们会一直优化没更多好消息发您,还想问题下干细胞培养老师,您用的培养体系二氧化碳是否有控制,是否是2%,还是5%二氧化碳。如果用EDTA消化,建议用我们优化胰酶可能细胞会更好(我们胰酶对细胞膜无损,可发试用)长期干细胞培养治疗相关,可长期讨论更多应用。我们后面也做重点科研讨论,

20231103

常见问题关于黑点

细工建议参考,用对试剂耗材(种子库级别细胞不建议用便宜试剂,保种上百只种子细胞,也用不了多少钱的)胰酶轻柔处理(避免枪直接吹打细胞损伤也是较重要指标参数),几代或十几代后,黑点会全部消失。这个建议也只是救助办法参考建议,经历过黑点的细胞,建议重新保种国内正规库来源细胞。

问题细胞系生长慢-原代生长慢-细胞养几代后就爬爬这种情况
细工建议参考 给出方案是进口瓶培养(康宁,nunc,德国产细工全部现货) ,种子库级别试剂(三千以上胎牛,我司验证五年以上南美)我司培养基或者是GIBCO培养基,放足培养基(多些也没关系)几天不动,看下恢复情况,结合我司胰酶(无损消化)传几代应该能找回较好状态,该方法也适合细胞养几代后就爬爬这种情况(上述方法也适合细胞养传代后细胞就爬爬这种情况,该因素原因很多,具体情况集体分析)该方法也建议原代首代培养(类器官)就是普通培养基加胎牛(因子贵,lag phase长、无血清不稳点)全部能替代,细胞够多或稳定后在上无血清可做参考。类器官配套耗材U型低(不加辅助条件成球)及磁珠配套磁力成球可来信告知索取资料及技术讨论。邮件联系

气泡培养伴随细节处:预判自动化培养关键点
吸液按到底,很多会忽略。大部分问题可解决,
上述问题细工统计解决问题比较顺利,大部分也没有常规判断的支原体等问题。23年解决几个案例非常成功。


成瘤不稳定组参考,首发少数技术老师参考
瓶,慢养慢传代慢生长,无损胰酶,少二氧化碳,减缓生长,减缓分化,理由:来自成干成球培养,难养细胞株痛点统计规律相似特点。分出一批评测,操作更简单,给成瘤不稳定组,提供一组备份条件,从成干特点上看,优势挺大的,也给出一套备份技术储备。
提醒:这类问题如有,培养部分上述注意外,种子来源非常重要,如是长期课题,种子建议国内正规库重新订购,并把试剂耗材部分尽量于正规库一致,一组,上述瓶并减二氧化碳一组,成干厌氧培养可查减缓细胞分化(理由一组救治培养,千万别图块)
细胞接种成瘤不稳定痛点咨询,来自北京一些实验室成瘤问题普遍降低,我们给出些参考,应用还不多,还在统计中,慢培养是一个因素,还有一个是缺氧培养,查了些资料,昆明海拔一千以上,能否从您那得到些细胞系培养与海拔较低地区,北京,上海,广州地区常规培养是否有生长慢特性,特点,后面这个验证顺利,还考虑总结合作更高海拔培养特点,宁夏西藏,高海拔总结统计还没开始。

20241119

自动化培养冗余试剂开发案例介绍-黑点、生长慢解决思路方法参考
问:
想请教一下各位老师,图里的是293t细胞,红框标识的地方细胞内有小黑点,而且会动,请问这可能是什么,有什么处理方案吗;当前尝试使用左氧当作支原体处理,目前看来无效?
就是怀疑细胞里面的黑点是某种胞内微生物污染
准备检测一下

答:
黑点讨论:用瓶用皿,生长时间多久,胰酶浓度可低些,提高血清浓度,换成瓶进口的,恢复下,养几天试试,要是生长时间长,上述很管用,血清厂家货号,培养基效期列出下,要是时间太长,补谷氨酰胺,或换成叫新批次,按上述做下,如有条件换成大牌子进口的,养几代会有改观。如有效果来信告知。我们统计黑点,生长慢问题

黑点发生,培养液不新鲜,血清营养含量不够,生长慢后,皿容易PH变化大,导致越来PH变化越大,过酸或过碱,瓶能改善,并能恢复,参考。我觉得检测意义不大,上述要列出来,问题就能很快排除,培养基都差不多,后面要长养细胞,叫新鲜要对厂家说出来,或者自己有补救办法。说的不对处请海涵。

验证后,再出现黑点问题,能很快排除,目前几个组按上述验证,用户还比较满意。

低浓度胰酶,0.05是个好习惯,消化时间虽然长些,膜无损更重要,正规库几个老技术都推荐,也不反驳同学用,0.25我们做自动化培养冗余试剂开发,胰酶浓度很关键。

0.25消化后的细胞,传代后会先恢复细胞膜在生长,细胞工厂大面积消化,我们有统计,还有就是成团成片类特性细胞,0.25容易把外面消化成泥,里面也没消化透 ,并伴随细胞老幼状态,上皮类团聚尤甚,293就是上皮类案例,老幼情况出现,细胞状态不一,难做后面实验,参考

避免建议,小克隆形成后,就用低浓度胰酶,消化成单个传代,大面积在消化,老幼问题用以出现,案例细胞,mdck

注:生长慢同理处理,疑问处可讨论痛点。经上述问题长期统计,黑点影响因素参考:培养基新鲜度(谷氨酰胺降解没发挥作用),血清营养程度(影响增殖生长),胰酶损伤程度(影响细胞膜完整)。通过问题验证试剂筛选推荐。上述针对细胞系含血清方案。原代无血清,建议含血清先摸出最优生长条件(2020年类器官相关统计)原代较好条件,上述处理步骤理解应用后,4-7天就会传代长满,培养时间太长,是培养条件不合适,所以建议含血清先行,大量细胞培养后,在上无血清相对容易。细节处告知详情讨论。建系目的标注清楚,我们推荐配套试剂,方法。

总结:类器官、人造肉、自动化培养、建系、微流控制培养等应用,长久看,各种培养中问题都要解决或者有突破,细工生物在这方面,根据自己能力财力,推荐含血清方案为主(容易实现,也是无血清培养条件验证大量细胞拿到验证前提,即便是临床研究应用目的,细胞量也是摸无血清培养条件前提)目前国内已有公司推出把类器官培养100培养工作一天完成成瘤成球,延展讨论以下体系培养中问题统计(涉及统计内容较多,有需要可留邮箱)。

20241127

冗余试剂开发需给设备、技术、细胞、水试剂、操作方法多方位融合,可行性高,基础实验要能顺利完成(解决痛点难点)或者提出可行性参考建系,国内五百家实验室,十年细胞培养问题统计,以最常见293案例,开始更多数据技术共享及自动化培养应用中统计开始,近五年细胞工厂应用,配合现在自动化培养、微流控制培养、细胞力学研究一些问题统计,统计更多自动化细胞培养中问题,建系目的,中式工业应用目的,简单易行思路。

以黑点,生长慢,提出细工方案参考,

需长期深入讨论,标注下,为讨论沟通精准性,建议告知详细资料需:

细胞来源,公司,正规库,等

耗材厂家货号

试剂厂家货号

细胞图片,增长描述,问题描述,实验理想目的。

珍贵株需救助的,对自动化培养有积极意义,讨论沟通标注下,我们最有兴趣的案例细胞,我们目的是建系,痛点难点问题更有兴趣,效果明显,成就感也大。

陆续后面会推出,简易单克隆可行性(国内建系为主),冻存复苏挑剔细胞(原代尤甚),自动化转染试剂开发、耐药株建立,缺氧培养是救助不成瘤主要思路(延展工业应用数据储备欢迎合作开发-工业户)相关资料都会发上来。

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