HB170512
 
Benzonase Nuclease 全能核酸酶
 
产品信息
 
  
   
产品名称
   
产品编号
   
规格
   
储存
  
  
   
Benzonase   Nuclease 全能核酸酶
   
20125ES25
   
25 KU
   
-20℃
  
  
   
Benzonase   Nuclease 全能核酸酶
   
20125ES50
   
50 KU
   
-20℃
  
  
   
Benzonase Nuclease 全能核酸酶
   
20125ES60
   
100 KU
   
-20℃
  
 
 
产品描述
 
全能核酸酶，又称广谱核酸酶，英文名称Benzonase Nuclease，一种来源于Serratia Marcescen的非特异性核酸内切酶，可在链内任意核苷酸间进行切割，将核酸完全消化成3-8个碱基长度的5-单磷酸寡核苷酸，能够在非常广泛的条件下（6M urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4% Triton X100，0.1% SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF）降解所有形式的（双链，单链，线状，环状，天然或变性）DNA和RNA，广泛用于去除生物制品中的核酸。
 
本产品由经基因工程改造的真核生物酵母菌表达纯化所得，不含原核生物表达体系自身的细菌内毒素，不仅应用在科研研究中，作为培养细胞上清和细胞裂解液去粘度的首选酶制剂，去除核酸干扰提高后续蛋白纯化或功能研究；而且应用在疫苗工业、蛋白和多糖类制药工业，去除宿主残留核酸，大大降低疫苗和蛋白类产品核酸污染至皮克级别，提高制品生物功效。
 
本品以无菌液体酶的形式提供，储存于缓冲液（20mM Tris-Cl pH8.0，2mM MgCl2，2mM NaCl，50%甘油）中，无色透明液体。
 
产品性质
 
  
   
英文别名（English Synonym）
   
BenzNuclease;   Universal Nuclease; Benzonase endonuclease
  
  
   
CAS号（CAS NO.）
   
9025-65-4
  
  
   
分子量（Molecular Weight）
   
27.9 kDa
  
  
   
纯度（Purity）
   
≥90%（SDS-PAGE）
  
  
   
酶活（Enzyme Activity）
   
≥250 U/μL
  
  
   
比活（Specific Activity）
   
≥1.0×106  U/mg蛋白
  
  
   
蛋白酶（Protease）
   
Undetected
  
  
   
内毒素（Endotoxin）
   
Undetected（鲎试剂法）
  
  
   
最适pH（Optimum pH）
   
8.0（工作范围pH 6-10）
  
  
   
最适温度（Optimum Temperature）
   
37℃（工作范围0-42℃）
  
  
   
辅助因子（Cofactor）
   
1-10 mM Mg2+
  
  
   
储存缓冲液（Storage Buffer）
   
20 mM Tris-Cl   pH8.0，2 mM MgCl2，2 mM NaCl，50%甘油
  
  
   
稀释缓冲液（Dilution Buffer）
   
20 mM Tris-Cl   pH8.0，2 mM MgCl2，2 mM NaCl
  
  
   
活性单位定义（Unit Definition）
   
在37℃，pH 8.0反应条件，2.625 mL反应体系中，在30 min内使△A260吸收值变化1.0（相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸）所用的酶量定义为一个活性单位（U）。
  
 
 
使用方法
 
1）细胞处理：a.贴壁细胞去除培养基，用PBS洗后，1 mL RIPA裂解液（或其他哺乳动物细胞裂解液）加10-20 uL全能核酸酶，室温或冰上孵育5-30 min，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实验。
 
b.悬浮细胞离心收集后，在离心管中加1 mL RIPA裂解液（或其他哺乳动物细胞裂解液）加10-20 uL全能核酸酶，室温或冰上孵育5-30 min，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实验。
 
2）组织样品：将30-100 mg动物或者植物组织研磨充分后，加入100-200 uL裂解液，同时加入加5-10 uL全能核酸酶，室温或冰上孵育5-30 min，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实验。
 
3）大肠杆菌或者其他细菌：细菌离心收集后，用裂解液裂解或者研磨破碎后，每1 mL加1-5 uL全能核酸酶，室温孵育30 min，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实验。
 
注：若溶液为高盐溶液，偏酸性或者偏碱性，含有较高浓度的去垢剂、变性剂，应适当增加酶量或孵育时间。
 
运输和保存方法
 
冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。若是打开包装后并4℃放置超过一周，建议过滤除菌防止微生物污染。
 
注意事项
 
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
 
推荐使用条件
 
  
   
 
   
最佳条件
   
有效条件
  
  
   
Mg2+
   
1-2 mM
   
1-10 mM
  
  
   
pH
   
8-9
   
6-10
  
  
   
温度
   
37℃
   
0-42℃
  
  
   
DTT
   
0-100 mM
   
>0 mM
  
  
   
巯基乙醇
   
0-100 mM
   
>0 mM
  
  
   
单价阳离子
   
0-20 mM
   
0-150 mM
  
  
   
磷酸根离子
   
0-10 mM
   
0-100 mM
  
 
 
推荐使用量
 
  
   
核酸酶用量（终浓度）
   
处理时间
  
  
   
0.25 U/mL
   
> 1 h
  
  
   
2.5 U/mL
   
15 min
  
  
   
25 U/mL
   
2 min